碧云天生產(chǎn)的Western螢光檢測試劑BeyoECL Plus是一種超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒,本產(chǎn)品與二抗上偶聯(lián)的辣根過氧化物酶發(fā)生化學(xué)反應(yīng),發(fā)出螢光,從而可以通過用X光片壓片或其它適當(dāng)化學(xué)發(fā)光成像設(shè)備檢測樣品。
碧云天生產(chǎn)的Western螢光檢測試劑目前共有三種,分別是P0018S/P0018M BeyoECL Plus、P0018AS/P0018AM BeyoECL Star和P0018FS/P0018FM BeyoECL Moon。常規(guī)的Western檢測,優(yōu)先推薦使用BeyoECL Star。對于豐度比較高的目的蛋白的檢測,例如內(nèi)參蛋白等的檢測,推薦使用性價比更高的BeyoECL Plus。對于低豐度較難檢測的目的蛋白,優(yōu)先推薦使用檢測靈敏度最高的BeyoECL Moon。但對于豐度適中的目的蛋白的檢測,不太推薦使用BeyoECL Moon,因為使用BeyoECL Moon時由于檢測靈敏度特別高,容易產(chǎn)生過曝的現(xiàn)象。
BeyoECL Plus靈敏度高,比DAB顯色的靈敏度至少高200倍,比Amersham公司的ECL或碧云天以前生產(chǎn)的BeyoECL的靈敏度高20-50倍左右,比Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate的靈敏度高3-100倍。
BeyoECL Plus的發(fā)光時間更長。在100微升1微克/毫升辣根過氧化物酶標記IgG中,加入100微升碧云天的BeyoECL Plus工作液或Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate工作液進行檢測。在暗房中,兩者均可發(fā)出肉眼可見的藍色螢光,但加入BeyoECL工作液的試管內(nèi)的亮度明顯高很多。最初數(shù)分鐘內(nèi)加入BeyoECL Plus工作液的試管發(fā)光強度是加入SuperSignal West Pico Substrate工作液的試管的3倍。約30分鐘后,加入BeyoECL Plus工作液的試管仍然可以發(fā)出肉眼可見的較強的藍色螢光,而加入Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate工作液的試管發(fā)出的螢光已經(jīng)很難用肉眼進行分辨,定量結(jié)果顯示此時加入BeyoECL Plus工作液的試管發(fā)光強度是加入SuperSignal West Pico Substrate工作液的試管的100倍以上(參考圖1)。
圖1. BeyoECL Plus和Pierce公司SuperSignal West Pico效果比較圖。詳細的比較方法如上所述。
BeyoECL Plus的高靈敏度可以大大節(jié)省寶貴的樣品以及非常昂貴的一抗和二抗的用量。同時必須注意適當(dāng)減少一抗和二抗或樣品的用量,以免獲得過深的難以比較灰度的條帶。
BeyoECL Plus和BeyoECL Star的檢測效果對比圖參考圖2。
圖2. BeyoECL Plus和BeyoECL Star的檢測效果對比圖。Western檢測過程中僅發(fā)光試劑不同,其余完全相同。
BeyoECL Plus采用了全新配方,更加穩(wěn)定。BeyoECL Plus的兩種試劑37℃水浴孵育30天,和4℃保存的試劑相比,對相同樣品的檢測效果無任何明顯差異。
BeyoECL Plus的背景很低,對PVDF膜和硝酸纖維素膜均適用。PVDF膜(FFP36/FFP39)和硝酸纖維素膜(FFN03)可以向碧云天訂購。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
P0018M-1 | BeyoECL Plus A液 | 250ml |
P0018M-2 | BeyoECL Plus B液 | 250ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
4℃避光保存,一年有效。37℃避光保存,一個月有效。如果長期不用,可以-20℃避光保存。-20℃可以保存更長時間。
注意事項:
BeyoECL Plus A液和B液在吸取過程中必須要更換槍頭,A液和B液相互污染后會導(dǎo)致A液或B液逐漸失效,影響后續(xù)的使用效果。
各溶液使用后,請蓋緊瓶蓋,以防失效。特別是B液,含有氧化劑,比較容易被還原而失效。
BeyoECL Plus的螢光持續(xù)時間很長,但開始反應(yīng)后的30分鐘內(nèi)螢光更強一些,隨后螢光會逐漸減弱,因此請注意充分利用這螢光較強的30分鐘進行壓片。
在BeyoECL Plus的檢測靈敏度仍不足以滿足實驗需要時,請選擇檢測靈敏度更高的BeyoECL Star (P0018AS/M)或BeyoECL Moon (P0018FS/M)。
BeyoECL Plus A液和B液均對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。